Accumulation of oocysts of Cryptosporidium parvum in Biomphalaria glabrata (Pulmonata: Planorbidae) under experimental conditions

Abstract INTRODUCTION: Cryptosporidium oocysts are easily transported to various aquatic environments. The objective of this study was to evaluate B. glabrata mollusks exposed to food containing C. parvum oocysts. METHODS: Six experimental groups were used with B. glabrata either exposed or not to C. parvum oocysts. Microscopic and molecular diagnostics were conducted in water samples and tissues of B. glabrata. RESULTS: By light microscopy, C. parvum oocysts were identified in the water of the exposed groups. C. parvum DNA was not detected in water but was detected in tissue samples. CONCLUSIONS: Further studies should be conducted under natural conditions.

Infecção natural de pombos (Columba livia) por Cryptosporidium spp / Natural infection of pigeons (Columba livia) with Cryptosporidium spp

O estudo teve como objetivo diagnosticar microscopicamente e molecularmente a presença de oocistos de Cryptosporidium spp. provenientes de amostras fecais de pombos (Columba livia) no município do Rio de Janeiro. As amostras fecais foram coletadas frescas, logo após as aves defecarem e acondicionadas sob refrigeração e encaminhadas para o processamento e pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. ao laboratório de Protozoologia do Departamento de Parasitologia, da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. As amostras foram submetidas a técnica de centrifugação e flutuação com solução saturada de açúcar e as lâminas observadas com objetiva de 40X. Nas amostras positivas para a presença de oocistos de Cryptosporidium spp. foi realizada a extração de ácido desoxirribonucleico (DNA) para uso nas reações em cadeia pela polimerase (PCR) e Nested-PCR. Um total de 387 amostras fecais de pombos foram obtidas, no diagnóstico microscópico foi possível a observação de oocistos deste parasita em 81 amostras (20,93%). Destas, 53 amostras amplificaram DNA específico para Cryptosporidium spp. na reação da Nested-PCR. Mundialmente, Cryptosporidium spp. parasitando pombos é assinalado em apenas quatro países: Turquia, China, Irã e Tailândia. O resultado encontrado neste trabalho, em três bairros populosos do município do Rio de Janeiro, revelou ser preocupante, por serem áreas onde há uma quantidade acentuada da população animal e humana, facilitando a dispersão e contaminação ambiental dos oocistos. Este é o primeiro registro no Brasil de parasitismo de Cryptosporidium spp. tendo como hospedeiro o pombo e estes resultados, não devem ser negligenciados.

The aim of this study was to diagnose microscopically and molecularly the presence of Cryptosporidium spp. oocysts from pigeons (Columba livia) faecal samples in Rio de Janeiro city. The fecal samples were collected fresh, after the birds defecated and conditioned under refrigeration and sent to the processing and research of Cryptosporidium spp. oocysts to the protozoology laboratory of the Parasitology Department, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. The samples were submitted to centrifugation and flotation with saturated sugar solution technique and the slides observed with a 40X objective. In the positive samples for the Cryptosporidium spp. oocysts the extraction of deoxyribonucleic acid (DNA) for polymerase chain reaction (PCR) and NestedPCR was performed. A total of 387 pigeons faecal samples were obtained, in the microscopic diagnosis it was possible to observe oocysts of this parasite in 81 samples (20.93%). Of these, 53 samples amplified DNA specific for Cryptosporidium spp. in the Nested-PCR reaction. Worldwide, Cryptosporidium spp. parasitizing pigeons is reported in only four countries: Turkey, China, Iran and Thailand. The results found in this study, in three populated neighborhoods of Rio de Janeiro city, were worrisome because they are areas where there is a marked quantity of animal and human population, facilitating the dispersion and environmental contamination of oocysts. This is the first record in Brazil of parasitism of Cryptosporidium spp. having as host the pigeon and these results, should not be neglected.

Avaliação clínica e molecular de cães com erliquiose / Clinical and molecular evaluation of dogs with ehrlichiosis

A erliquiose monocítica canina é uma doença cosmopolita causada por Ehrlichia canis e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, sendo frequentemente diagnosticada em cães em todo o Brasil. Este trabalho teve por objetivo investigar citológica e molecularmente a infecção por Ehrlichia em 195 cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, analisando os achados clínicos e laboratoriais. Nos 48 cães atendidos com citologia positiva para Ehrlichia sp., foi possível verificar a diversidade de sinais, com predominância estatisticamente significativa de palidez de mucosas (P≤0,05), assim como variados achados hematológicos, ocorrendo tanto anemia, leucopenia e trombocitopenia, quanto normalidade ou aumento dessas células. Ocorreu aumento das proteínas plasmáticas, com hiperglobulinemia, sem, no entanto, haver diferença significativa (P≥0,05), apesar de esse achado ser frequente nessa afecção. Por meio do PCR nested, confirmou-se a infecção por E. canis em cães da cidade de Cuiabá.

The canine monocytic ehrlichiosis is a cosmopolitan disease, caused by Ehrlichia canis, transmitted by ticks Rhipicephalus sanguineus that has been frequently diagnosed in dogs throughout the country. This study aimed to investigate the cytological and molecular Ehrlichia infection in 195 dogs examined at the University Veterinary Hospital of Mato Grosso, by analyzing the clinical and laboratory findings. In 48 dogs with positive cytology for Ehrlichia sp it was possible to detect the diversity of signs, with predominance statistically significant of pallor of mucous membranes (P≤0.05) as well as several hematological findings, occurring anemia, leukopenia and thrombocytopenia, or increased as normal cells. There was increased of plasma proteins, with hyperglobulinemia, however without any significant difference (P≥0.05), although this finding is common in that infection. Through the nested PCR technique it was possible to confirm the infection by E. canis in the city of Cuiaba.

Infecção natural por Cryptosporidium sp. em aves domésticas comercializadas em mercados municipais do Estado do Rio de Janeiro / Natural infection by Cryptosporidium sp. in domestic fowls sold at local markets

O objetivo do trabalho foi comparar a dinâmica, a ocorrência, a morfometria de oocistos e os períodos patentes de Cryptosporidium sp. em aves domésticas, patos (Anas platyrhynchos), pintos (Gallus gallus) e codornas (Coturnix japonica), naturalmente infectadas, provenientes de dois mercados municipais do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro (RJ). Houve diferenças quanto à ocorrência da infecção entre os dois locais e entre pintos e patos, mas não entre codornas. Para a morfometria, foram observadas diferenças estatísticas nas medidas dos diâmetros maior e menor e para o índice morfométrico calculado (P<0,01). Já entre pintos e codornas não houve diferenças (P>0,05). Na comparação do período de eliminação, patos tiveram um maior período com maiores quantidades de oocistos eliminados. Codornas e pintos apresentaram dinâmica de eliminação semelhante e não houve diferença quanto à concentração de oocistos. Pintos foram mais susceptíveis à infecção seguidos por patos e codornas. Pode-se concluir que a infecção natural por Cryptoporidium sp. foi frequente nas aves estudadas. Patos, pintos e codornas podem ser disseminadores do protozoário em mercados municipais do Rio de Janeiro, RJ. Assim, podem constituir risco de infecção.

The objective of the current study was comparing the dynamic and occurrence of Cryptosporidium sp., as well as the morphometry and elimination period of oocysts in naturally infected ducks (Anas platyrhynchos), chickens (Gallus gallus) and Japanese quails (Coturnix japonica) from two local markets of Rio de Janeiro, RJ. There were significant differences considering the occurrence of infection between the two markets, and also between chickens and ducks, but not among Japanese quails. Also, significant statistical differences were observed in morphometry, considering the major and minor diameters of oocysts and the calculated morphometric index (P<0.01); however, there was no difference between chickens and Japanese quails (P>0.05). According to the elimination period, ducks eliminated oocysts for a longer period and in a higher number. Japanese quails and chickens had a similar dynamic of oocysts elimination, no difference in its concentration was observed. Chickens were the most susceptible bird species to Cryptosporidium sp. infection, followed by ducks and Japanese quails. In conclusion, Cryptosporidium sp. natural infection was commonly found in the studied fowls. Ducks, chickens and Japanese quails may disseminate this protozoan in local markets of Rio de Janeiro, representing risk of infection.